在生命科學(xué)領(lǐng)域中,生物分子間的相互作用具有非常重要的作用。通過分子間相互作用分析不僅可闡明細(xì)胞生物學(xué)事件,而且為疾病發(fā)生機(jī)制和藥物發(fā)現(xiàn)提供基礎(chǔ)。MST技術(shù)是一種基于檢測在溫度梯度中的生物分子電泳遷移率的變化而檢測生物分子間結(jié)合、解離過程,獲取分子間相互作用的模式和動(dòng)力學(xué)常數(shù)等方面信息的新技術(shù),是近年來發(fā)展的研究生物分子相互作用的強(qiáng)有力工具,已廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域研究。
微量熱泳動(dòng)是一種表征生物分子特性的光學(xué)方法,是粒子在微觀溫度梯度中的定向運(yùn)動(dòng)。生物分子的質(zhì)量、電荷、水化層和構(gòu)象發(fā)生改變均可導(dǎo)致分子在溫度梯度場中運(yùn)動(dòng)速度的變化,這種變化可以用來分析分子間相互作用以及各種化學(xué)劑量學(xué)參數(shù)。
微電泳儀利用帶電粒子在電場中的遷移速度不同來實(shí)現(xiàn)分離的技術(shù),通過測定粉體的Zeta電位來認(rèn)識粉體表面電性,這在粉體表面處理中是一個(gè)重要的手段。
MST技術(shù)將熒光檢測的精確性和熱泳動(dòng)的差異性及靈敏性結(jié)合起來,提供了一種靈活、穩(wěn)定和快速檢測分子間相互作用的方法,在分析分子相互作用中有的優(yōu)勢,不依賴于分子大小、種類的影響,甚至水化層的微小變化也可檢測到;可檢測溶液中低至pM濃度的分子間相互作用;樣品消耗量在μL級;可以在復(fù)雜緩沖液中包括血漿和細(xì)胞裂解液中進(jìn)行結(jié)合分析;還可以分析結(jié)合模式和位點(diǎn)數(shù)、蛋白解聚、熱力學(xué)和酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)等,是一種強(qiáng)大的詳細(xì)研究生物分子特征的強(qiáng)有力工具。
在生命科學(xué)的眾多領(lǐng)域已經(jīng)成功使用MST技術(shù)進(jìn)行了不同生物分子間的相互作用定量分析研究。通過探討分子間有無結(jié)合、結(jié)合位點(diǎn)數(shù)量、分子間相互作用親和力等,可為配體、底物、疾病靶點(diǎn)的確定和目標(biāo)物篩選、濃度分析等提供基礎(chǔ),因此,MST技術(shù)在藥物篩選、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、分子檢測和醫(yī)學(xué)診斷等生命科學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用發(fā)展迅速,對推動(dòng)基礎(chǔ)生物醫(yī)學(xué)研究和更好的藥物開發(fā)有重要作用。